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熒光顯微鏡是用來觀察研究樣品熒光現象的光學顯微鏡,目前主要用落射照明技術,由光源、濾片系統、光路系統等組成。
熒光光源——般采用超高壓汞燈(50一200W)或者高功率LED光源,它可發出各種波長的光,但每種熒光物質都有一個產生最強熒光的激發光波長,所以需加用激發濾片(一般有紫外、紫色、藍色和綠色激發濾片),僅使一定波長的激發光透過照射到標本上,而將其他光都吸收掉。每種物質被激發光照射后,在極短時間內發射出較照射波長更長的可見熒光。熒光具有專一性,一般都比激發光弱,為能觀察到專一的熒光,在物鏡后面需加阻斷(或壓制)濾光片。它的作用有二:一是吸收和阻擋激發光進入目鏡、以免于擾熒光和損傷眼睛,二是選擇并讓特異的熒光透過,表現出專一的熒光色彩。兩種濾光片必須選擇配合使用。濾片系統是熒光顯微鏡的重要組成部分,由激發濾片、二向色性濾光片、發射濾片組成。激發濾片位于光源和標本之間,允許特定波長范圍的光通過,作為樣品的激發光。發射濾片位于物鏡和目鏡之間,允許標本發射的熒光通過,以獲得清晰的圖像。二向色性濾光片在激發濾片和發射濾片之間,是一種入射角為45º的干涉濾光片,它可以反射一定波長的光同時透過另外波長范圍的光線。</s
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